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Tesis:

Análisis génico del sistema de oxidación de hidrógeno en Rhizobium y Bradyrhizobium

  • Autor: MURILLO MARTINEZ, Jesús

  • Título: Análisis génico del sistema de oxidación de hidrógeno en Rhizobium y Bradyrhizobium

  • Fecha: 1990

  • Materia: HIDROGENACIÓN;ENZIMAS;BACTERIAS

  • Escuela: E.T.S. DE INGENIEROS AGRONOMOS

  • Departamentos: SIN DEPARTAMENTO DEFINIDO

  • Acceso electrónico:

  • Director/a 1º: RUIZ-ARGÜESO, Tomás

  • Resumen: La presente Tesis doctoral llega a las siguientes conclusiones 1. La mayoría de las cepas de Bradyrhizobium sp. (Lupinus) analizadas son altamente ineficientes en simbiosis con altramuces. Las pérdidas medias de energía por producción de H2 de 22 cepas examinadas en simbiosis con Lupinus angustifolius fueron del 50 por ciento. 2. Se han identificado cinco cepas de Bradyrhizobium sp. (Lupinus) que inducen un sistema de oxidación de H2 en simbiosis con tres especies de altramuces y/o con Ornithopus compressus. 3. La expresión del sistema Hup en nódulos de altramuz y Ornithopus está controlada por la leguminosa hospedadora. En general Lupinus angustifolius fue el hospedador menos permisivo para la expresión de la actividad hidrogenasa. 4. El análisis comparativo del DNA hup ha demostrado la existencia de dos tipos diferentes de secuencias hup en Bradyrhizobium sp. (Lupinus). 5. Las unidades de transcripción hupV y hupVI de Rl viceae se inducen en vida libre en respuesta a microaerobiosis. Esta expresión es independiente de nifA y de cualquier otro gen presente en el plásmido simbiótico no localizado en la agrupación hup. Asimismo, la presencia de Ni++, H2 o actividad girasa no regulan la expresión de las regiones hupV y hupVI. En R. meliloti la transcripción por el promotor de la región hupV está controlada por el sistema fixLJ/fixK, que regula la expresión de genes nif y fix en respuesta a.O2. 6. La cepa UPM791 de Rl viceae no contiene genes homólogos a fixLJ de R. meliloti 7. Mediante la expresión in vivo en células de E. coli se ha demostrado que la región hupV contiene al menos dos genes que codifican para proteínas de aproximadamente 39 y 79 kDa. 8. Mediante secuenciación de un fragmento de 1,8 kb de la región hupV se han identificado tres secuencias posiblemente codificantes (ORF51, ORF52 y ORF53) que probablemente pertenecen a un mismo operón. La ORF52 (299 aminoácidos) está completa en el fragmento secuenciado y codifica probablemente para la proteína de 39 kDa observada en E. coli al expresar el operón hupV. La ORF53 se localiza después de la ORF52 y coincide con el DNA que codifica para la proteína de 79 kDa en E. coli. La ORF51 precede a la ORF51 y no se corresponde con ningún producto génico identificable en E. coli. 9. En la secuencia que precede a la ORF52, y que forma parte de la ORF51, se han identificado posibles secuencias de reconocimiento por Fnr, IHF y NtrA, por lo que es posible que en esta zona se localize el promotor del operón hupV y que la ORF51 no sea codificante