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Tesis:

Aplicación de técnicas de cultivo in vitro a la conservación de Coronopus navasii Pau, Lavatera oblongifolia Boiss y Centaurium rigualii Esteve, tres especies endémicas de la Península Ibérica en peligro de extinción

  • Autor: IRIONDO ALEGRIA, José María

  • Título: Aplicación de técnicas de cultivo in vitro a la conservación de Coronopus navasii Pau, Lavatera oblongifolia Boiss y Centaurium rigualii Esteve, tres especies endémicas de la Península Ibérica en peligro de extinción

  • Fecha: 1991

  • Materia: PROTECCIÓN DE LAS PLANTAS;SISTEMAS DE CULTIVO;CULTIVO IN VITRO

  • Escuela: E.T.S. DE INGENIEROS AGRONOMOS

  • Departamentos: BIOLOGIA VEGETAL

  • Acceso electrónico:

  • Director/a 1º: PEREZ RUIZ, César

  • Resumen: En el presente trabajo se estudió la aplicación de técnicas de cultivo in vitro a la conservación de tres especies vegetales endémicas de la Península Ibérica, en peligro de extinción: Coronopus navasii Pau, Lavatera oblongifolia Boiss y Centaurium rigualii Esteve. Los ensayos de germinación de semillas en Coronopus navasii y Lavatera oblongifolia mostraron una baja eficacia de la reproducción sexual dentro de las condiciones ensayadas. Se establecieron los métodos para la micropropagación de Coronopus navasii, Lavatera oblongifolia y Centaurium rigualii y se ensayaron los efectos de los reguladores de crecimiento en cada una de sus etapas. De esta manera, se llevó a cabo la micropropagación de Coronopus navasii a partir de explantos de nodos cotiledonares y de raíz de plántulas obtenidas a partir de la germinación de semillas en medio MS base. La utilización de un medio MS + 4.44 MBAP + 0.54 M NAA permitió una gran proliferación de yemas adventicias. Para el enraizamiento resultó adecuado el medio MS base. En Lavatera oblongifolia, se tomaron explantos cotiledonares de plántulas obtenidas a partir de la germinación de semillas en medio MS base, que dieron lugar a callo. Se obtuvo un intensa proliferación del callo y formación de yemas adventicias en un medio MS + 4.44 M BAP + 0. 54 M NAA. Los tallos aislados proliferaron en los medios MS + 0.44 M BAP + 0.05 M NAA y MS + 4.92 M IBA. Se logró el enraizamiento directo de los tallos al transferirlos a macetas con una mezcla 3:1 de turba/ vermiculita estéril. La utilización de recipientes de vidrio de 6x7cm. permitió una mayor elongación de los tallos y un posterior enraizamiento en medio MS base. En Centaurium rigualii se tomaron explantos de tallo y hoja de una única planta cultivada en el invernadero. Se consiguió proliferación de yemas adventicias en un medio MS + 0.44 M BAP + 0.05 M NAA. Para el enraizamiento se utilizó un medio MS base. En las tres especies se logró la aclimatación en macetas con una mezcla 3:1 turba/ vermiculita estéril manteniendo una alta humedad relativa en un mini invernadero "Propagator" de Sankey, Ltd. y tratando con 2.8 g/l Tiram. Se estudió la conservación "in vitro" de las mencionadas especies ensayando diferentes condiciones de temperatura, iluminación y medio nutritivo. En términos generales, los mejores resultados se obtuvieron a 5º C y en medio MS + 4.44 M BAP + 0.54 M NAA. Se evaluaron las posibilidades de utilización de técnicas de caracterización morfométrica mediante análisis de imagen asistido por ordenador, electrofóresis de isoenzimas en gel de poliacrilamida y recuentos cromosómicos como métodos para controlar la estabilidad genética y efectuar un seguimiento del material micropropagado. Las técnicas de análisis de imagen asistido por ordenador constituyeron una herramienta rápida y eficaz en el seguimiento de las plantas micropropagadas, la comparación con plantas propagadas por otros métodos o plantas del hábitat natural y la detección de diferencias de carácter epigenético. Las pequeñas diferencias detectadas en líneas subclonales mediante el estudio de los patrones isoenzimáticos no fueron atribuidas a causas genéticas ya que no se mantuvieron en el tiempo. El recuento de cromosomas permitió la detección de poliploidía en dos líneas subclonales de Coronopus navasii. En L.oblongifolia y C.rigualii, especies para las que se da por primera vez su número cromosómico, no se detectaron variaciones en el grado de ploidía atribuibles a las técnicas de cultivo in vitro