Tesis:
Caracterización génica y funcional del sistema ureasa de Rhizobium leguminosarum bv. viciae.
- Autor: TOFFANIN, Annita
- Título: Caracterización génica y funcional del sistema ureasa de Rhizobium leguminosarum bv. viciae.
- Fecha: 2001
- Materia: Sin materia definida
- Escuela: E.T.S. DE INGENIEROS AGRONOMOS
- Departamentos: BIOTECNOLOGIA
- Acceso electrónico:
- Director/a 1º: PALACIOS ALBERTI, José Manuel
- Resumen: La ureasa (urea amidohidrolasa E.C.3.5.1.5.) cataliza la hidrólisis de urea con producción de amoniaco y Co2. La presencia de actividad ureasa ha sido analizada en Rhizobium leguminosarum bv viciae UPM791, encontrando valores de 300 mU.mg protein-1 en células vegetativas. Niveles más bajos de actividad (ca.100 mU. mg protein-1) han sido encontrados en bacteroides inducidos por la misma cepa en guisante. El análisis de secuencia de una región de ADN de aproximadamente 9 kb ha permitido identificar los genes estructurales (ure A, ure B y ure C), genes accesorios (ure D, ure E, ure F, y ure G), y 5 orfs (orf3, orf5, orf6, orf8 y orf9) codificantes para proteínas de función desconocida. Tres orfs (orf3, orf5 y orf6) corresponden a orfs homólogas de la agrupación génica de la ureasa de Sinorhizobium meliloti. orf9 codifica para una potencial proteína transmembrana con un dominio C-terminal de tipo GGDEF. Un mutante en orf9 expresa niveles normales de actividad ureasa en cultivos celulares. ureE, una de las proteínas accesorias, muestra una región rica en histidinas característica de proteínas de unión a níquel. Un mutante afectado en ureE recupera parcialmente su actividad en respuesta a la adición de níquel al medio de crecimiento. Experimentos llevados a cabo con la finalidad de estudiar la complementación cruzada entre proteínas que unen níquel para la síntesis de ureasa e hidrogenasa (ure E and Hyp B, respectivamente) indican que estas proteínas no son funcionalmente intercambiables en R. leguminosarum.