Tesis:
Análisis del apareamiento meiótico durante la profase de la primera división en ecotipos normales mutantes meióticos de Arabidopsis thaliana
- Autor: MARTIN CARNES, José Javier
- Título: Análisis del apareamiento meiótico durante la profase de la primera división en ecotipos normales mutantes meióticos de Arabidopsis thaliana
- Fecha: 2004
- Materia: Sin materia definida
- Escuela: E.T.S. DE INGENIEROS AGRONOMOS
- Departamentos: BIOTECNOLOGIA
- Acceso electrónico:
- Director/a 1º: ORELLANA SAAVEDRA, Juan
- Resumen: En el presente trabajo se ha utilizado la técnica hibridación in situ de f1uorescencia {FISH) para analizar la evolución en la asociación de distintas regiones cromosómicas a lo largo de la profase temprana de la primera división meiótica en Arabidopsis thaliana. Se emplearon sondas correspondientes a distintos tipos de secuencias como la secuencia repetida pAlib que constituye la gran mayoría de la cromatina centromérica, la secuencia repetida pAR21, que se localiza en la heterocromatina pericentromérica, la sonda pAt2512 correspondiente a la secuencia de un tRNA que se encuentra en el brazo corto del cromosoma I, y el BAC F19K16 que se corresponde con una secuencia distal del brazo corto del cromosoma I. Contrariamente a lo indicado por otros autores, se comprobó que la cromatina no sufre ningún tipo de reorganización en células en interfase premeiótica en leptotena permaneciendo con una disposición similar a la encontrada en células somáticas. Es en cigotena temprana cuando se produce un cambio en la distribución de la cromatina en el interior del núcleo que conduce al agrupamiento de las regiones centroméricas,y que lleva además aparejada la asociación homóloga de esas regiones, al menos en el cromosoma I. Así mismo se ha observado que el proceso de asociación homóloga tiene lugar en dos etapas claramente diferenciadas En la primera, se observa un incremento brusco en los niveles de asociación homóloga en las regiones pericentroméricas y dístales analizadas. Posteriormente hay un avance más suave en todas las regiones analizadas hasta conseguir la plena asociación. En esta segunda etapa ha observado una clara dependencia entre las regiones centroméricas e insterticiales. El análisis de células en diplotena y metafase I con las sondas específicas anteriormente señaladas ha revelado que la distribución de quiasmas es uniforme tanto a lo largo del brazo corto del cromosoma I como entre distintos bivalentes de un mismo ecotipo. Mediante el empleo de la sonda rDNA 45S se comprobó que las regiones organizadoras del nucleolo (NOR) se fusionaban en la profase temprana y que esta fusión tenía lugar en dos etapas. En su primer momento, en células en premeiosis y leptotena, las regiones NOR se agrupan en un volumen reducido del núcleo apareciendo dos señales nítidas junto a un número indeterminado de señales descondendas, en contraposición con las células somáticas en las que se observaron cuatro señales nítidas. En una segunda etapa, en cigotena temprana., las regiones NOR se fusionan completamente, apareciendo una única señal en los ecotipos Columbia y Wassilewskija, manteniéndose en este estado hasta la etapa de diplotena. El análisis de los mutantes meióticos asy1 y dmc1, que tienen afectados procesos de apareamiento y recombinación respectivamente, reveló que el primero de ellos muestra ciertos niveles de asociación homóloga, sobre todo en la región pericentromérica del cromosoma I correspondiente a la sonda pAR21, mientras que el mutante dmc1 no muestra signos de asociación en ninguna de las regiones analizadas. Este comportamiento se asemeja a lo observado previamente en eucariotas inferiores, como levaduras, en los que el apareamiento de las regiones homólogas es posterior y dependiente de las etapas iniciales de la recombinación.