Tesis:
Control de Monilinia laxa en fruta de hueso: desarrollo de Penicillium frequentans ATCC 66108 como agente de biocontrol.
- Autor: GUIJARRO DIAZ-OTERO, Belén
- Título: Control de Monilinia laxa en fruta de hueso: desarrollo de Penicillium frequentans ATCC 66108 como agente de biocontrol.
- Fecha: 2007
- Materia: Sin materia definida
- Escuela: E.T.S. DE INGENIEROS AGRONOMOS
- Departamentos: BIOTECNOLOGIA
- Acceso electrónico:
- Director/a 1º: DE CAL Y CORTINA, María Antonieta
- Resumen: Monilinia spp. causa marchitez en brotes y flores del melocotonero, así como la podredumbre de los frutos produciendo pérdidas importantes en años con climatología favorable para el desarrollo de la enfermedad. El control biológico mediante la aplicación de antagonistas (biofungicidas) puede ser una alternativa a otros métodos de control y, en todo caso, es una herramienta más a utilizar en el control integrado de enfermedades vegetales. El control biológico mediante la introducción de antagonistas ha tenido un amplio desarrollo a nivel experimental. Sin embargo su aplicación práctica presenta serios inconvenientes referidos principalmente a la dificultad de obtener formulaciones comerciales de fácil manejo y eficaces en condiciones no controladas de campo, así como a su compatibilidad con otros productos. Por otro lado, la filosfera es un medio poco favorable para conseguir un biocontrol consistente por lo que es necesario conocer la dinámica de poblaciones del agente de biocontrol y del patógeno si se quiere conseguir un buen control de la enfermedad. La investigación de nuevas alternativas para el control biológico de la podredumbre parda causada por los hongos del género Monilinia comenzó realizando una búsqueda de antagonistas frente al patógeno entre la microflora epifita anual de los brotes de melocotonero tanto in vitro como in vivo. Se demostró el potencial del antagonista Penicillium frequentans en el control biológico de la marchitez de los brotes causada por Monilinia laxa en huertos experimentales bajo inoculación artificial del patógeno. En esta tesis se pretenden establecer las bases para conseguir la puesta a punto de un método práctico de control biológico de la podredumbre parda causada por M. laxa a través del Agente de Biocontrol (ACB) Penicillium frequentans. Para ello se han planteado los siguientes objetivos: 1- Encontrar un medio de cultivo que permita la obtención de biomasa del ACB P. frequentans viable y eficaz de una forma rápida y económica. 2- Obtener un formulado que mantenga la viabilidad y eficacia del ACB P. frequentans a lo largo del almacenaje y durante y tras su aplicación. 3- Conseguir que el ACB P. frequentans colonice de forma eficaz la filosfera, se establezca a unos niveles altos de población y mantenga la viabilidad de sus propágulos en las superficies de la planta con el fin de alcanzar una máxima eficacia frente al patógeno. Para conseguir estos objetivos, en primer lugar se probaron diferentes sistemas de producción en masa de las conidias de P. frequentans (fermentación líquida y fermentación sólida). Posteriormente se buscó un sistema de formulación que mantuviera la viabilidad y estabilidad de las conidias así producidas. Para ello se probaron varios sistemas de deshidratación celular (liofilización, atomización y lecho fluido) y se determinaron las condiciones más favorables para su conservación (contenido de humedad, temperatura, presencia de oxígeno y luz). Finalmente, para mejorar su estabilidad y eficacia se añadieron sustancias estabilizantes y adherentes que aseguraran la permanencia del agente de biocontrol en la superficie vegetal tratada, favoreciendo así su interacción con el patógeno. Las diferentes formulaciones obtenidas de P. frequentans se ensayaron en el control de la podredumbre de los frutos mediante aplicaciones de postcosecha. También se probó la eficacia de dichas formulaciones en tratamientos a árboles en los huertos en floración y precosecha. En estos ensayos se estudió también la dinámica poblacional de P. frequentans en la superficie de flores y frutos. Los resultados obtenidos en esta tesis muestran las características favorables que presenta el ACB P. frequentans para su aplicación comercial como biofungicida. Se han obtenido los siguientes resultados concretos: 1- Un método de producción en masa mediante fermentación en sustrato sólido de conidias de P. frequentans. Con este método se obtienen 108-109 conidias/gr de sustrato seco, con una viabilidad de 80-90% y una efectividad de 48-65 por ciento en tratamientos de postcosecha. El coste de este medio es de 2€/unidad de producción (bolsa de fermentación de 500g), precio que se considera bajo. 2- Tres formulados que presentan una alta estabilidad, adhesión a la superficie del fruto y eficacia respecto a las conidias frescas de P. frequentans. Estas formulaciones se han obtenido a través de: A.- la utilización de un sistema eficaz de deshidratación celular: el secado por lecho fluido, con el que se mantiene la viabilidad de las células deshidratadas y su efectividad frente al patógeno tras un año de almacenaje a temperatura ambiente. B.- la adición de sustancias estabilizantes que mantienen una viabilidad y efectividad del ACB P. frequentans superior al 50 por ciento a temperatura ambiente durante 12 meses. C.- la adición de adherentes que mejoran la permanencia del agente de biocontrol en la superficie vegetal tratada, favoreciendo así su interacción con el patógeno. D.- la adición de gel de sílice como producto inerte que mejora el manejo, y aplicación de las formulaciones en forma de polvos mojables, que se suspenden en agua para ser aplicados sobre la superficie vegetal. 3- Las formulaciones obtenidas presentan una eficacia del 48-65 por ciento sobre la podredumbre de frutos en tratamientos de postcosecha. 4- La aplicación de los formulados obtenidos en tratamientos biológicos realizados en huertos comerciales muestran que: A.- El antagonista debe ser aplicado en floración temprana, entre la caída de pétalos y el endurecimiento del endocarpio y en precosecha, para mantener una población adecuada que sea eficaz en el control de la podredumbre parda. B.- Mediante estos tratamientos biológicos se ha incrementado la población nativa de P. frequentans hasta niveles adecuados para el control de Monilinia spp: se reduce la población del patógeno en la superficie del melocotonero, reduciendo por ello el inóculo potencial. C.- La distribución poblacional de P. frequentans depende de las condiciones ambientales (temperatura y humedad relativa) y del momento y número de aplicaciones realizadas.