Tesis:
Enfermedades fúngicas de madera en planta joven de vid (Vitis vinífera L.)
- Autor: AROCA AGUILAR, M. Angeles
- Título: Enfermedades fúngicas de madera en planta joven de vid (Vitis vinífera L.)
- Fecha: 2008
- Materia: Sin materia definida
- Escuela: E.T.S. DE INGENIEROS AGRONOMOS
- Departamentos: BIOTECNOLOGIA
- Acceso electrónico:
- Director/a 1º: RAPOSO LLOBET, Rosa
- Director/a 2º: GARCIA - ARENAL RODRIGUEZ, Fernando
- Resumen: En los últimos años se ha detectado un aumento de las enfermedades fúngicas de madera en plantas jóvenes de vid en todas las áreas productoras de vid a nivel mundial. En este trabajo se ha estudiado el estado sanitario de las plantas comerciales utilizadas en las nuevas plantaciones en España, demostrando que están infectadas por los patógenos de enfermedades de madera (Phaeoacremonium spp., Phaeomoniella chlamydospora, especies tipo-Botryosphaeria, Cylindrocarpon spp. y Phomopsis spp.). Los hongos del género Phaeoacremonium y Phaeomoniella chlamydospora, implicados en las enfermedades de Yesca en planta adulta y Petri en planta joven, son difíciles de aislar y de identificar por los métodos convencionales de aislamiento en medio de cultivo, por lo que se ha desarrollado un método basado en la PCR para detectar e identificar nueve especies de Phaeoacremonium en vid. Se ha diseñado un par de cebadores que hibrida en la región ITS del ADNr de nueve especies de Phaeoacremonium, amplificando un fragmento de 415 pb. Tras la digestión enzimática del fragmento amplificado con las enzimas BssKI, EcoO109I y HhaI se ha obtenido un patrón de bandas, que ha permitido la diferenciación de todas las especies de Phaeoacremonium, excepto P. angustius y P. vitícola. La diferenciación de estas dos especies se ha realizado mediante la amplificación de un fragmento del gen de la tubulina, utilizando cebadores específicos para cada especie. Para la detección de Phaeomoniella chlamydospora se han utilizado los cebadores Pch1-Pch2. Se ha demostrado que tanto las plantas madre utilizadas como portainjertos de vid como los viveros son las principales fuentes de inóculo de los patógenos de enfermedades de madera. En el 11,8 por ciento de las plantas madre muestreadas se ha aislado en medio de cultivo alguno de los hongos de enfermedades de madera y en el 11,2 por ciento de las muestras tomadas en viveros (agua de amerado, tijeras de poda, máquinas de injertado y turbas) se ha detectado por PCR alguna de las especies de Phaeoacremonium o P. chlamydospora. Además se ha demostrado que las estacas sanas se infectan con P. aleophilum y P. chlamydospora en los viveros durante las fases de enraizamiento y de amerado cuando están en presencia de estacas enfermas, y que el uso de fungicidas en el baño de amerado no evita la infección de las estacas sanas, aunque sí reduce la frecuencia de infección. La eficacia de los fungicidas ensayados ha sido variable, dependiendo del nivel de inóculo de la estaca infectada. Cuando éste era bajo, no hubo infección de estacas sanas en presencia de Cubiet y Sporekill (Didecildimetil cloruro amónico), pero sí con Quinosol, demostrando su baja eficacia a pesar de ser el fungicida más usado en viveros de vid. Se ha estudiado la patogenicidad de las especies de Phaeoacremonium mediante su inoculación en plántulas y estacas de vid, confirmando que todas las especies estudiadas producen síntomas de enfermedad, necrosis en tallo y hojas, defoliación y muerte en plantas procedentes de semilla de cultivar Malvar y Airen. Estas especies inoculadas en las estacas de portainjertos R-110 produjeron decoloración vascular, mientras que sólo algunas de ellas produjeron reducción de la masa radicular y necrosis internerviales en las hojas. Por último, se han caracterizado las especies de Phomopsis aisladas de las vides españolas. Se han identificado por análisis morfológico, cultural y filogenético las especies: Phomopsis vitícola, Phomopsis quercella (= Amphiorthe leiphaemia), Phomopsis sp1, Phomopsis sp4, Phomopsis sp6, Diaporthe viticola, Diaporthe ambigua y Diaporthe helianthi. Los resultados de los ensayos de patogenicidad realizados con estas especies mostraron que todas ellas, excepto Diaporthe ambigua y D. helianthi, producían lesiones significativamente mayores que las producidas por el testigo en brotes lignificados, mientras que en brotes verdes la patogenicidad de estas especies era variable, siendo P. vitícola el más virulento.